Development of activatable antibodies targeting CD133 for enhanced cancer stem cell selectivity

Autor/a

Bentanachs Raset, Jordi

Abstract

El glioblastoma multiforme (GBM) es el tumor cerebral primario más maligno y actualmente es incurable. Uno de los principales obstáculos para el tratamiento de este tipo de tumor es la presencia de células madre cancerosas (CSC), las cuales tienen quimiorresistencia y capacidad para inducir nuevos tumores una vez finalizado el tratamiento. Las terapias dirigidas a CSC presentan varios inconvenientes, como el hecho de que los receptores sobreexpresados ​​en estas células también están presentes en las células madre sanas. Con el objetivo de afrontar este problema, generaremos una nanoteràpia que administre de forma selectiva al tumor. Para ello, vamos a crear un anticuerpo activable que se una a CD133, el marcador extracelular más estudiado en las CSC. Este trabajo de fin de grado forma parte de un proyecto europeo que tiene como objetivo generar una nanoteràpia génica dirigida capaz de eliminar las CSC para el tratamiento de la GBM. Primero, revisaré las estrategias disponibles para hacer que los anticuerpos sean activables y, después, describiré y discutiré mi contribución para generar un anticuerpo activable anti-CD133.
En la primera parte de este estudio, revisamos las diferentes estrategias para desarrollar anticuerpos activables y su potencial en aplicaciones terapéuticas, así como en diagnóstico, cromatografía e investigación básica. Los anticuerpos activables son anticuerpos convencionales diseñados para controlar su actividad a través de estímulos específicos. Las estrategias para conferir tal respuesta al estímulo pueden variar desde la modificación de un solo aminoácido hasta modificaciones más drásticas que alteran toda la estructura. Se ha utilizado una amplia gama de estímulos para controlar la actividad de los anticuerpos, los cuales incluyen proteasas, fosfatasas, pH, luz, moléculas efectoras, iones y temperatura.
En la segunda parte de este estudio, aplicamos una de las estrategias de activación de anticuerpos con mayor potencial en inmunoterapia para generar un fragmento de anticuerpo de cadena sencillos (scFv) anti-CD133 dependiendo de proteasa. Esta técnica se basa en enmascarar la región de unión al antígeno con un péptido, el cual imita el epítopo, que se une al anticuerpo a través de una secuencia sensible a proteasas tumorales. En este proyecto, se clonan tres variantes del scFv dependiente de proteasa y una de ellas se expresa y se purifica. Finalmente, se presentan los primeros pasos para evaluar la unión del scFv anti-CD133 en células.

Director/a

Oller Salvia, Benjamí
 

Estudios

IQS SE - Grado en Biotecnología

Fecha

2020-09-08