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Autor/a
del Pozo Fàbregas, Blanca
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Abstract
El injerto de derivación de arteria coronaria (CABG) es un procedimiento en el que se utilizan arterias o venas autólogas como injertos para evitar arterias coronarias total o parcialmente ocluidas. La vena safena es el conducto de bypass más utilizado, pero su extracción implica una gran incisión en la pierna. Este trabajo propone una alternativa diferente para superar estos problemas: el uso de vasos vasculares cadavéricos. Las técnicas de descelularización aplicadas en estos vasos podrían terminar con el scaffold biológico que el paciente puede necesitar para la CABG. Por otro lado, las técnicas de recelularización en el armazón biológico pueden regenerar la capa endotelial, que es necesaria para mantener la permeabilidad y prevenir la trombosis de los injertos vasculares.
En este trabajo, se utilizaron arterias femorales y venas safenas de donantes para estudiar su posible aplicación a la CABG mediante técnicas de descelularización. Se han considerado diferentes protocolos de descelularización utilizando soluciones y enzimas hipo e hipertónicas. Se llevaron a cabo ensayos cuantitativos para asegurar que se mantuvieran las biomoléculas estructurales y que el ADN se redujera después de la descelularización. También se llevaron a cabo ensayos cualitativos para analizar la estructura y orientación de ECM. También se estudiaron las propiedades biomecánicas. Finalmente, como los vasos descelularizados se conservaron en glicerol, se definió un protocolo de limpieza para obtener un scaffold final libre de glicerol, que se analizó para determinar su potencial citotoxicidad. Se llevaron a cabo experimentos de recelularización utilizando células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) una vez que se confirmó la no citotoxicidad de los vasos descelularizados.
Se pudo definir el mismo protocolo de descelularización para las arterias femorales y las venas safenas, aunque se informaron diferencias menores entre los tejidos. La cantidad de biomoléculas estructurales y también su estructura se mantuvieron después del protocolo de descelularización. Además, las propiedades biomecánicas también se mantuvieron constantes después del protocolo de descelularización. Por otro lado, los resultados del protocolo de limpieza confirmaron que fueron necesarios al menos cinco lavados con NaCl al 0,9% para obtener tejidos libres de glicerol. El análisis de citotoxicidad confirmó la actividad no citotóxica de los vasos vasculares. Finalmente, el primer intento de recelularizar los vasos obtenidos demuestra que las HUVEC se pueden sembrar en estos vasos, pero es necesario mejorar el protocolo para obtener un vaso completamente recelularizado.
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