Estudio de métodos analíticos para determinar las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, a niveles de trazas, en plantas medicinales

Autor/a

Mulero Raichs, Mar

Abstract

Las aflatoxinas son metabolitos secundarios producidos por hongos filamentosos del género Aspergillus, concretamente por A. flavus, A. parasiticus y A. nonius en determinadas condiciones de estrés, de temperatura y de humedad. Las aflatoxinas B1, B2, G1, and G2 son las más comunes y estudiadas debido a su toxicidad genotóxica y carcinogénica, así como por su ocurrencia natural en productos derivados de la agricultura, como las plantas. Las plantas medicinales han sido ampliamente usadas como remedios caseros, así como, materias primas en la industria farmacéutica. Durante los procesos de cosecha, almacenaje y distribución, las plantas medicinales son sujetas a contaminación por hongos, responsables de la producción de aflatoxinas. Debido al incremento del consumo de éstas plantas y a la falta de una legislación global que establezca los límites máximos permitidos para cada aflatoxina en plantas medicinales, su uso se ha convertido en un problema de salud pública. La farmacopea europea (EP), británica (BP) y alemana (GP) han implementado los niveles máximos permitidos más estrictos para regular la presencia de aflatoxinas en plantas medicinales: 2 μg kg-1 para la aflatoxina B1 y 4 μg·kg-1 para la suma de aflatoxinas B1, B2, G1, and G2. Sin embargo, no existen métodos oficiales disponibles para cuantificar aflatoxinas a estos niveles (ppb) en matrices complejas, como las plantas.
En este estudio se ha desarrollado y validado un método analítico para la cuantificación simultánea de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2 en diferentes plantas medicinales adquiridas en herbolarios locales (Menta piperita, Rosmarinus officinalis y Eucalyptus globulus). Las etapas de extracción y purificación han sido optimizadas mediante el estudio de los parámetros: modo de extracción, temperatura aplicada, tipo y composición del disolvente, peso de muestra y tipo de cartucho de purificación (SPE o IAC). El procedimiento optimizado se basa en una extracción acelerada con disolvente (ASE) usando MeOH:H2O (3:2), seguido de una purificación mediante columnas de inmunoafinidad. Los extractos se han analizado con cromatografía líquida de alta resolución acoplada a un espectrómetro de masas triple cuadrupolo con un modo de ionización electrospray ESI (+) (LC-ESI-MS/MS), alcanzando un límite de cuantificación de 1 μg·kg-1. El método ha sido validado evaluando los parámetros: linealidad, precisión, exactitud y límite de cuantificación. No se han detectado aflatoxinas de forma nativa en las muestras de plantas medicinales analizadas.

 

Director/a

Gotor Navarra, Gemma
Broto Puig, Francesc  

Estudios

IQS SE - Máster en Química Analítica

Fecha

2020-09-13