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Autor/a Vilafranca i Tello, Miquel |
Abstract La marchitez bacteriana causada por la bacteria transmitida por el suelo Ralstonia solanacearum se ha convertido en una a preocupación a nivel mundial. Cada año afecta a cientos de especies vegetales, entre ellas algunos cultivos de gran importancia agrícola, por lo que en algunos países tiene un impacto colateral tanto a nivel económico como social. Sin embargo, en algunas especies, la planta presenta una respuesta defensiva siendo resistente a la bacteria. Este es el caso de la variante de tomatera (Solanum lycopersicum) Hawaii 7996, aunque el mecanismo detrás de la respuesta no está claro. El grupo de Enfermedades Vegetales Bacterianas y Muerte Celular Vegetal del CRAG trabaja actualmente en su comprensión centrándose en el proteoma secretado por tomatera, precisamente, en el papel que podría desempeñar la proteína relacionada con la patogénesis (PR) PR-1. Y a pesar de que se ha demostrado que PR-1 presenta actividad antimicrobiana, su mecanismo de acción también ha sido siempre una gran incógnita. Por ello, este trabajo de fin de grado se ha centrado en analizar el papel que las proteasas P69D y P69B podrían desempeñar en el procesamiento y subsecuente activación de PR-1, en particular en el corte y liberación del péptido CAPE1, constitutivo de la PR-1, del que estudios recientes han puesto de manifiesto su implicación como péptido de señal durante la respuesta inmune de la planta. Para ello, cuatro clases de vectores de PR-1de tomatera, transformados en células de A. tumefaciens AsE, fueron expresados transitoriamente en hojas de Nicotiana benthamiana, y las proteínas resultantes fueron extraídas y tratadas con P69. Finalmente, para abordar el inconveniente que supone la expresión transitoria por lo que respeta a la cantidad limitada de proteína expresada, se evaluó la concentración de L-arabinosa requerida para optimizar la expresión de PR-1, para en futuros ensayos, expresar de forma heteróloga la proteína recombinante en células TOP10 de E. coli. |
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Director/a Carnicer Heras, Marc |
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Estudios IQS SE - Grado en Biotecnología |
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Fecha 2021-09-07
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