Desarrollo de nuevos marcadores de selección para células de mamífero

Autor/a

Jaroslavsky Dodo, Ariel

Abstract

En la producción de moléculas biológicas, es conveniente disponer de biocatalizadores que expresen el producto de interés de forma estable. Para ello se utilizan los marcadores de selección, que permiten la selección de las células que se han modificado e incorporado el material genético que codifica para una proteína de interés, así como mantener la población celular modificada. BHRF1 es una proteína homologa a Bcl-2, proveniente del virus de Epstein-Barr. Tras la infección vírica, las células activan la cascada apoptótica. Al interaccionar con las proteínas pro apoptóticas, BHRF1 puede reprimir la vía intrínseca de la apoptosis elongando la estancia del huésped en la célula. En este trabajo se plantea utilizar esta proteína como marcador de selección en mamíferos, utilizando condiciones que induzcan la vía intrínseca de la muerte celular programada. Esto tiene un cierto grado de relevancia económica, al suponer el ahorro de antibióticos para seleccionar cultivos de mamíferos, y también científica al brindar una alternativa nueva para seleccionar células transfectadas.
Se realiza un diseño experimental para averiguar las condiciones que permitan que BHRF1 actúe como marcador de selección, así como para evaluar la eficiencia de esta selección y el efecto de la presencia de esta proteína en la producción de otras. Este planteamiento da lugar a la necesidad de construir 3 plásmidos: pGFPneo3, GFP-BHRF1 y BHRF1puro3. Se construye y secuencia pGFPneo3 y se obtiene un candidato razonable para GFP-BHRF1, que no ha sido secuenciado.

 

Director/a

Lecina Veciana, Martí
Leivar Rico, Pablo 

Estudios

IQS SE - Grado en Biotecnología

Fecha

2021-09-07