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Autor/a
Roig Martínez, Albert
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Abstract
El glioblastoma multiforme (GBM) es el tumor cerebral primario más maligno y actualmente es incurable. Uno de los principales obstáculos para su tratamiento es el transporte restringido de medicamentos a través de la barrera hematoencefálica (BHE). Este TFG se centra en el desarrollo de péptidos capaces de superar la BHE y forma parte de un proyecto europeo que pretende generar una nanoteràpia génica enfocada al tratamiento del GBM.
Los péptidos se encuentran entre el ámbito de los fármacos basados en moléculas orgánicas pequeñas y los agentes bioterapéuticos, lo que les permite combinar lo mejor de ambos mundos. Como las proteínas, los péptidos presentan una alta afinidad y selectividad y, como las moléculas pequeñas, son sintéticamente accesibles, fáciles de derivar ya menudo presentan una inmunogenicidad baja. Sin embargo, el principal obstáculo para una aplicación más amplia recae en su susceptibilidad a la degradación por proteasas.En la primera parte de este trabajo, revisamos las principales estrategias para conferir una alta resistencia metabólica a los péptidos y la relevancia de introducir estas modificaciones en su capacidad para alcanzar la diana biológica de interés. Aunque hay un amplio abanico de estrategias de modificación peptídica disponibles, la mayoría de las investigaciones realizadas se han centrado en introducir aminoácidos D o restringir la flexibilidad conformacional a través de la ciclització. Por otra parte, aunque la conjugación a una carga voluminosa puede proporcionar cierta protección para blindaje estérico, el aumento de la resistencia del péptido a las proteasas aumenta sustancialmente su eficiencia.
En la segunda parte de este trabajo, hemos aplicado la estrategia de la ciclación a un péptido afín al receptor de transferrina (Y1), con la voluntad de incrementar su resistencia a proteasas y su afinidad por el receptor. Hemos diseñado una biblioteca con la versión lineal, cíclicas y bicícliques de este péptido preservando la estructura secundaria prevista. Las versiones lineales se sintetizaron con éxito mediante la síntesis de péptidos en fase sólida, tal como se valoró por MALDI-TOF y UPLC-UV. En relación a la ciclització con un andamio trifuncional (TBMB), el planteamiento tanto en resina como en solución dieron lugar a la formación de la péptidos cíclicos deseados. Encontramos que la glicina N-terminal y el grupo protector Fmoc tenían un papel importante en la eficiencia de la ciclación. Finalmente, se intentó conjugar la carboxifluoresceïna los péptidos para facilitar el estudio de su interacción con células. Aunque la reacción de conjugación sólo se consiguió a pequeña escala y que requiere ser optimizada, el acoplamiento de la Cf al N-terminal del péptido lineal (más accesible) y la posterior ciclación resultó ser la estrategia más prometedora.
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